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    線粒體活性氧產生速率(ROS)測試盒

    型 號

    產品時間2024-11-21

    所屬分類氧化磷酸化系列

    報價600

    產品描述:線粒體活性氧產生速率(ROS)測試盒(熒光法)活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產物過氧化物和羥化物等,研究表明,機體95%以上的活性氧(ROS)都來自于線粒體,其失衡所致的氧化應激與細胞生長增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程有關。
    正常情況下,細胞內抗氧化防御系統(tǒng)與氧自由基處于平衡狀態(tài),細胞內活性氧(ROS)

    產品概述

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    產品名稱

    規(guī)格

    貨號

    線粒體活性氧產生速率(ROS)生化檢測試劑盒(熒光法)

    100/96  

    EY-01S151

     

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    測定意義:                         

    活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產物過氧化物和羥化物等,研究表明,機體95%以上的活性氧(ROS)都來自于線粒體,其失衡所致的氧化應激與細胞生長增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程有關。

    正常情況下,細胞內抗氧化防御系統(tǒng)與氧自由基處于平衡狀態(tài),細胞內活性氧(ROS)水平維持在較低的生理范圍;在病理情況下,細胞內抗氧化系統(tǒng)與氧自由基的平衡被打破,細胞內活性氧水平過多,就可破壞線粒體酶類、脂類和核酸,使機體出現氧化應激,同時,活性氧還可攻擊線粒體DNA產生氧化損傷,導致線粒體ATP合成減少、線粒體膜電位破壞等結構和功能變化。

    因此,通過檢測活性氧的變化來判斷線粒體的功能是否正常具有重要意義。

    測定原理:

    熒光探針-還原型二氯熒光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可擴散通過線粒體膜,在線粒體內被酯酶水解,形成無熒光的DCFHDCFH迅速與ROS反應生成熒光物氧化型二氯熒光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF) 根據上述原理設計了利用熒光法直接定量檢測線粒體ROS產生速率的方法。將熒光強度隨時間變化的數據點擬合,線性回歸直線斜率與ROS產生的速率呈正比。

    需自備的儀器和用品:

    多功能酶標儀、恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調式移液器、冰、蒸餾水。

     



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    試劑一:液體×1瓶,室溫保存。

    試劑二:液體×1瓶,4℃保存。              

    試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現配現用。

    試劑四:液體×1支,4℃保存。

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    1、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。

    2、細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測。

    3、血清等液體:直接測定。

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    蛋白激酶(A)熒光共振能量轉移法(FRET)、(B)化學發(fā)光法(luminometry)、

    通用型胱(cystine)含量比色法定量檢測試劑盒

    MR-VP發(fā)酵管  BR    20  國產/進口

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    組蛋白H3-K27乙酰化檢測試劑盒

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    組織硫氧還蛋白還原酶(thioredoxin reductase)活性比色法定量檢測試劑盒

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    微生物干燥培養(yǎng)基

    通用型細胞培養(yǎng)污染性支原體屬鑒定16S rDNA

    含酶TSA培養(yǎng)基平板(7cm  10/  用于醫(yī)藥環(huán)境監(jiān)測

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    強化梭菌培養(yǎng)基(RCM  250g  用于梭菌的分離培養(yǎng)

    MUG培養(yǎng)基  MUG-Mediumwith Kovacs  培養(yǎng)基20g+靛基質20m  大腸埃希氏菌快速熒光測定

    腦組織固著液(Bouin固著液)

    瓊脂(不含亞碲酸)  250g  用于的選擇性分離培養(yǎng)

    ER培養(yǎng)基  Eriksson Medium  10  BR

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    大毛霉   細菌肥料  /

     

     

     

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    (1)按照蛋白濃度計算

    活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

    ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T

    =1608×△÷Cpr

    (2)按照樣本質量計算

    活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

    ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T

    =1608×△A÷W

    (3)按細胞數量計算

    活性單位定義:25℃中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

    ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細胞數量×V樣÷V樣總)÷T

    =1608×△A ÷細胞數量

    (4)按液體體積計算

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