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    小鼠胚胎成纖維細胞

    型 號

    產品時間2024-12-07

    所屬分類小鼠原代細胞

    報價2600

    產品描述:小鼠胚胎成纖維細胞公司正在出售的產品:細胞脂質過氧化物異構前列(ISOPROSTANE)比色法測定試劑盒
    細胞脂質過氧化物異構前列(ISOPROSTANE)細胞流式分析試劑盒
    冰凍切片脂質過氧化物異構前列(ISOPROSTANE)熒光染色試劑盒
    石蠟切片脂質過氧化物異構前列(ISOPROSTANE)熒光染色試劑盒
    脂質過氧化物異構前列(ISOPROSTANE)ELISA定量測定試劑盒

    產品概述

    小鼠胚胎成纖維細胞

    細胞基本屬性:

    產品名稱

    小鼠胚胎成纖維細胞

    組織來源

    胚胎

    種屬

    小鼠

    生長特性

    貼壁生長

    形態特征

    成纖維細胞樣

    英文名稱

    Embryonic   Fibroblasts Cells

    貨號

    EY-XY3751

    規格

    5x105cells/T251mL凍存管

    質量檢測:VimentinKeratin蛋白免疫熒光染色法,純度高于85%,支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

    產品規格:5x105cells/T251mL凍存管

    培養基:小鼠胚胎成纖維細胞培養基

    培養條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37

    換液頻率:每2-3天換液一次

    消化液:0.25%

    產品貨期現貨,1周左右

    運輸方式T25培養瓶/ 順豐快遞(包郵)

    供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用

    背景介紹:

    小鼠胚胎成纖維細胞采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,小鼠胚胎成纖維細胞分離自胚胎;成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的胚胎成纖維細胞呈圓形







    原代細胞的分離培養:

    原代培養即直接從有機體取下細胞、組織或器官,讓它們在體外維持與生長。原代培養的特點是細胞或組織剛離開機體,它們的生物性狀尚未發生很大的改變,在一定程度上可反映它們在體內的狀態,表現出來源組織或細胞的特性, 因此用于藥物實驗,尤其是藥物對細胞活動、結構、代謝、有無毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養法有組織塊培養法和消化培養法。

    (一)組織塊培養法

    許多實驗室喜歡用組織塊培養法進行原代培養,因為方法簡單,細胞也較容易生長。尤其是培養心肌,有時還可觀察到心肌組織塊搏動。細胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養皿或培養瓶后, 即可進行傳代。

    1. 設備材料

    培養箱、冰箱、超凈工作臺/無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養瓶、培養皿、消化液、基礎培養液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。

    2. 操作步驟

    (1) 在無菌條件下,取待培養的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。

    (2)用眼科剪將組織塊反復剪成0.5~ 1mm3的小塊。

    (3)再用Hanks 溶液反復漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。

    (4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養液。

    (5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養皿內表面,吸去多余的培養液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養皿蓋,做好標記, 置37°C 的CO2培養箱內。

    (6) 2~4h 后,于超凈工作臺中,緩緩地向培養皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養液少量,以使組織塊浸沒在培養液中。

    (7)輕輕地將培養皿及組織塊移至CO2 培養箱, 如無特殊情況,不必觀察。1~2 周后,可觀察到細胞從組織塊邊緣長出,形成生長暈。

    (9) 一般說來,若培養液無明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細胞長滿整個培養皿內表面,即可進行傳代培養。

    QQ截圖20240105153042.png

    操作方法:

    組織塊直接培養法(原代細胞培養實驗)

    材料與儀器

    【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數量的未分化的間質細胞,成纖維細胞可從這些細胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個【實驗材料】每組的超凈臺中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個;3、50ml離心筒2個4、滅菌培養皿1個,細胞培養瓶1個5、1ml,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個6、細胞計數板1塊;7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;8、酒精燈1臺;

    步驟

    1) 胚胎的分離。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個胚胎轉移至一個小的無菌培養皿中,用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在無菌狀態下,將絞碎的胚胎轉移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無菌,用攪拌棒輕輕攪動。4)在溫暖的環境中或置于37°C培養箱中輕輕搖動15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細胞的液體轉移至一無菌50ml的離心管中,該管內按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中,重復步驟4和5。7)離心混合的細胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細胞,按步驟7再次離心。9)用PBS反復洗滌細胞直至上清清亮為止。

    公司正在出售的產品:

    鋅指蛋白98抗體

    細胞半-6CASPASE-6)活性比色法定量檢測試劑盒

    5-ROX蛋白標記試劑盒

    通用型人體腺病毒(adenovirus)定性檢測試劑盒

    CREB蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

    轉基因產品35S基因檢測試劑盒

    熒光穩定/稀釋溶液

    細胞鈣調蛋白(CaM)活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒

    101491229812299

    全組織肌肉磷酸化酶(Myophosphorylase)活性染色試劑盒

    5-羥基二十四烯酸(5-HETE)高效液相色譜法定量檢測試劑盒

    微管(microtubules)熒光染色試劑盒

    人體細胞N-乙酰轉移酶2NAT2)活性比色法定量檢測試劑盒

    載玻片細胞βAMYLOID蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

    體液基質金屬(MMP-13)活性熒光定量檢測試劑盒

    染色體核型吉姆莎染色分析試劑盒

    粘蛋白4重組兔單克隆抗體

    甘油二酯激酶η/DGK-η抗體

    去整合素樣金屬15抗體

    Kelch樣蛋白22抗體

    細胞角蛋白19抗體

    ZYG11A蛋白抗體

    快速周期調節蛋白SPDYE1抗體

    小鼠胚胎成纖維細胞ATP6蛋白抗體


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