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    小鼠外周血樹突狀細胞(DC細胞)

    型 號

    產(chǎn)品時間2024-12-07

    所屬分類小鼠原代細胞

    報價2600

    產(chǎn)品描述:小鼠外周血樹突狀細胞(DC細胞)公司正在出售的產(chǎn)品:組織銅離子濃度比色法定量檢測試劑盒
    體液銅離子濃度比色法定量檢測試劑盒
    食物銅離子濃度比色法定量檢測試劑盒
    環(huán)境銅離子濃度比色法定量檢測試劑盒
    細胞銅離子濃度熒光定量檢測試劑盒

    產(chǎn)品概述

    1.jpg

    產(chǎn)品名稱

    小鼠外周血樹突狀細胞(DC細胞)

    貨號

    EY-XY3704

    英文名稱

    DC Cells

    規(guī)格

    5x105cells/T251mL凍存管

    質(zhì)量檢測:CD11c免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等

    產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T251mL凍存管

    培養(yǎng)基:小鼠外周血樹突狀細胞(DC細胞)培養(yǎng)基

    培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37

    換液頻率:每2-3天換液一次

    消化液:0.25%

    產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右

    運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)

    供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用

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    小鼠外周血DC細胞采用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞、培養(yǎng)過程添加細胞因子誘導(dǎo)而來,小鼠外周血DC細胞分離自外周血,由外周血單核細胞誘導(dǎo)而成的;樹突狀細胞(Dendritic cells, DC)是機體功能的專職抗原遞呈細胞,它能高效地攝取、加工處理和遞呈抗原,未成熟DC具有較強的遷移能力,成熟DC能有效激活初始型T細胞,處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)。DC的來源有兩條途徑:①髓樣干細胞在GM-CSF的刺激下分化為DC,稱為髓樣DC,也稱DCl,與單核細胞和粒細胞有共同的前體細胞


    3.png3.jpg

    收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)

    傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)

    傳代代數(shù)可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

    傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿

    傳代方法

    1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

    2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;

    3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

    4.待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。

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    1.準(zhǔn)備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

    2.布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。

    3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。

    4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液,然后一并倒入三角燒瓶中,結(jié)扎瓶口或塞以膠塞。

    5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

    6.分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

    7.計數(shù):用計數(shù)板計數(shù),如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說,pH要求在7.2~7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整。

    8.培養(yǎng):置于36.5℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶蓋需擰松半圈。

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