CCC-HPF-1人胚肺成纖維細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠心肌細(xì)胞MCM 小鼠E-鈣粘附分子(E-Cadherin/CDH1/CD324)ELISA試劑盒 Sox9a： 轉(zhuǎn)錄因子sox9a抗體 P815 小鼠肥大細(xì)胞癌細(xì)胞

Promocell C-27438 Adipocyte Nuition Medium, 脂肪細(xì)胞營養(yǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml 小鼠E-鈣粘附分子(E-Cadherin)ELISA試劑盒 SPAC7： 頂端體相關(guān)蛋白7抗體 CL-0203SCaBER(人膀胱鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

PA317(小鼠成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠Endoglin蛋白(ENG)ELISA試劑盒 SPAG16： 相關(guān)蛋白16抗體 人腎近端小管上皮細(xì)胞(HRPTEpiC)

人腎小管上皮細(xì)胞;HKC 小鼠Egl小鼠Nine同源物1(EGLN1)ELISA試劑盒 SPAG17： 相關(guān)抗原17抗體 人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;CFPAC-1 大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

ACVRL1 Others Canine 狗 ALK1 / ACVRL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 小鼠EGF樣域蛋白7(EGFL7)ELISA試劑盒 SPAG8： 相關(guān)抗原8抗體 非洲綠猴腎細(xì)胞;Vero E6

WISP1 Protein Human 重組人 CCN4 / WISP1 蛋白 (His 標(biāo)簽) 大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒 JNK (Rat c-Jun N-terminal kinases,JNK)  大鼠c-Jun基末端激酶 96T

MAGED1： 黑色素瘤相關(guān)抗原D1抗體 BMPR1B Others Human 人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

大鼠腎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA 試劑盒 Mouse serine/threonine protein kinase,STK  小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶 96T

MIER2： 中胚層誘導(dǎo)早期反應(yīng)蛋白2抗體 ACHN, 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 胚肺細(xì)胞,HLF細(xì)胞 Hep 3B2.1-7 [Hep 3B; Hep-3B; Hep3B](人肝癌細(xì)胞)

B2M Others Cynomolgus 食蟹猴 B2M / Beta-2-microglobulin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大鼠異檸檬酸脫氫酶1(IDH1)ELISA試劑盒 TSH 人血清(TSH) 96T

CCC-HPF-1人胚肺成纖維細(xì)胞HOXD10： 同源盒蛋白HOXD10抗體 ANGPTL1 Others Canine 狗 ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

Balb/c小鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Balb/c mouse bone marrow mesenchymal stem cells 人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體(EBMZ)ELISA 試劑盒 OGP (Ostegenic Growth Peptide) 成骨生長肽 (骨生長激素肽)(蛋白多肽) 0.5mg

HHIPL1： HHIP樣蛋白1抗體 家兔皮膚細(xì)胞;DR-S1 神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞，SH-SY5Y細(xì)胞 U14細(xì)胞，小鼠子細(xì)胞

KDR Others Rat 大鼠 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人抗斑疹傷抗體(ai-typhus-Ab)ELISA 試劑盒 OPN 骨橋蛋白(多肽抗原) 0.5mg

HOXA10： HOXA10抗體 CL-0406NCI-H838(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

注意事項(xiàng)：

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。