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    pHyVec4

    型 號

    產品時間2024-11-23

    所屬分類質粒

    報價

    產品描述:pHyVec4質粒是使用廣泛的基因操作工具,可以進行編碼基因、microRNA、lncRNA的功能研究、啟動子活性、轉錄因子及3’UTR調控研究等。

    產品概述

    質粒名稱:pHyVec4

    質粒規格:2ug

     

    實驗步驟:

    1)質粒提取

    1.10,0001min離心收集1.5-5ml菌液沉淀于1.5ml離心管中

    2.加入100溶液1,振蕩至*懸浮

    3.加入200溶液2,立即輕柔顛側離心管6次,使菌體充分裂解,隨后將離心管冰上放置

    3分鐘

    4.加入150山溶液3,立即溫和顛倒離心管數次,冰上放置3分鐘,10,00g離心10mins

    5.將步驟4的上清轉移至新的離心管(盡量去除雜質),加入等體積的苯酚/氖仿/異成醇混

    合均勻10,000離心5min

    將步驟5的上清轉移至新的離心管,加入2倍體積的無水乙醇,室溫放置5-1omin,沉

    降DNA

    7.10000g離心10分鐘,棄乙醇,保留沉淀,加入1ml706的乙醇洗滌沉淀,10,000離

    心5分鐘

    8.倒掉乙醇溶液,用吸水紙吸凈管壁上的水珠,室溫蒸發痕量乙醇

    9.加入適量含 Rnase的TE或滅菌雙蒸水溶解質粒DNA

    2)質粒鑒定瓊脂糖礙膠電泳

    灌膠:膠中加入芡光染料< SYBR Green)

    加樣:質粒+上樣緩沖液→混勻

    電泳

    結果觀察:UV燈下

     

    pHyVec4實驗分析:

    裂解細胞中除含有質粒DNA外,還含有基因組DNA、各種RNA、蛋白質和脂類等物質,因

    用堿裂解法除去雜質

    1、防止DNA裂解: Solution1

    1)、所含糖增加溶洨黏度,維持滲透壓,防止DNA受機械剪切作用降解

    2)、所含EDTA抑制酶活性

    2、溶解與變性: Solution2

     

    100370-200301 泛酸鈣 HPLC法含量測定 50mg

    100371-200802 烏苯美司 含量測定 100mg

    100373-200502 阿苯達唑 含量測定 100mg

    100374-200903 苯磺酸氨氯地平 含量測定 100mg

    100375-200502 鹽酸特拉唑嗪 含量測定 100mg

    100376-201001 氯化鈉 含量測定 100mg

    100379-200501 氨力農 UV法含量測定 100mg

    100380-200301 更昔洛韋 含量測定 50mg

    100381-200301 腎上腺色腙 檢查用 50mg

    100382-200301 紫杉醇 含量測定 30mg

    100384-200501 大蒜素 含量測定 0.5ml

    100385-200401 豆腐果苷 HPLC法含量測定 100mg

    100386-200702 吡拉西坦 含量測定 100mg

    100387-200401 呋咱甲氫龍(夫拉扎勃) 含量測定 50mg

    100388-200401 *泊苷 含量測定 100mg

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