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    土壤過氧化物酶(SPOD)生化檢測試劑盒

    型 號

    產(chǎn)品時間2024-11-23

    所屬分類土壤系列

    報價300

    產(chǎn)品描述:土壤過氧化物酶(SPOD)生化檢測試劑盒S-POD主要來源于土壤微生物,能夠氧化土壤有機(jī)物質(zhì)產(chǎn)生過氧化物,在腐殖質(zhì)的形成過程中具有重要作用。

    產(chǎn)品概述

    商品屬性:

    產(chǎn)品名稱:土壤過氧化物酶(SPOD)生化檢測試劑盒

    規(guī)格:100/96 50/48 

    貨號 : EY-01S1297

    測試方法:微量法 可見分光光度法  

    分類:土壤系列

    商品詳情:

    測定意義:                          

    S-POD主要來源于土壤微生物,能夠氧化土壤有機(jī)物質(zhì)產(chǎn)生過氧化物,在腐殖質(zhì)的形成過程中具有重要作用。

    測定原理:

    S-POD催化有機(jī)物質(zhì)氧化成醌,后者在430nm有特征光吸收。

    自備用品:

    可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、50mL(不允許快遞)、研缽、冰和蒸餾水。

    5.png



    ADH測定操作:

    1. 分光光度計預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。

    2. 試劑三在25℃水浴中保溫30 min。

    3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL樣本上清液、800μL試劑三和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A測定管=A1-A2。

    測定步驟:

    1、分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。

    2、將試劑二在37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴10min以上。

    3、操作表:

    試劑名稱μL

    測定孔

    樣本

    20

    試劑二

    760

    試劑三

    10

    試劑四

    10


    將上述試劑按順序加入1 mL石英比色皿中,混勻后立即在340 nm波長下記錄初始吸光度A1和反應(yīng)1min后的吸光度A2,計算ΔA=A1-A2。

    注意:若A1-A2大于0.5,需將樣本用提取液稀釋,使A1-A2小于0.5,可提高檢測靈敏度。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

    NAD-MDH活力單位的計算:

    1、血清(漿)NAD-MDH活力的計算

    單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

    NAD-MDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=6430×ΔA

    2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中NAD-MDH活力的計算:

    (1)按樣本蛋白濃度計算:

    單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

    NAD-MDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr

    (2)按樣本鮮重計算:

    單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

    NAD-MDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T =6430×ΔA÷W

    (3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算:

    單位的定義:每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

    NAD-MDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總)÷T=3.215×ΔA

    V反總:反應(yīng)體系總體積,8×10-4 L;ε:NADH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.02mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,1 min;W:樣本質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;2000:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),2000萬。

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