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    單寧酶(TAN)生化檢測試劑盒

    型 號

    產品時間2024-11-22

    所屬分類氧化與抗氧化系列

    報價300

    產品描述:單寧酶(TAN)生化檢測試劑盒單寧酶全稱是單寧酯酰水解酶(Tannase,EC 3.1.1.20),它可以水解沒食子酸單寧中的酯鍵和縮酚羧鍵,生成沒食子酸和糖。

    產品概述

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    產品名稱

    規格

    貨號

    單寧酶(TAN)生化檢測試劑盒

    100/48 50/24   

    EY-01S178

     

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    測定意義:

     單寧酶全稱是單寧酯酰水解酶(TannaseEC 3.1.1.20),它可以水解沒食子單寧中的酯鍵和縮酚羧鍵,生成沒食子酸和糖。

     測定原理: 

    使用抗氧化劑沒食子酸丙酯(PG)作為單寧酶酶促反應的底物,在270nn下測定底物PG反應前后的光密度變化,計算單寧酶酶活力。

     需自備的儀器和用品:

     紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96UV板、研缽、冰、蒸餾水





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    試劑一:液體×1瓶,室溫保存。

    試劑二:液體×1瓶,4℃保存。              

    試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現配現用。

    試劑四:液體×1支,4℃保存。


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    1、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。

    2、細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測。

    3、血清等液體:直接測定。


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    (1)按照蛋白濃度計算

    活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

    ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T

    =1608×△÷Cpr

    (2)按照樣本質量計算

    活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

    ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T

    =1608×△A÷W

    (3)按細胞數量計算

    活性單位定義:25℃中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

    ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細胞數量×V樣÷V樣總)÷T

    =1608×△A ÷細胞數量

    (4)按液體體積計算

    活性單位定義:25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

    ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T

    =1608×△A

    ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光徑,1 cm;V反總:反應體系總體積,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;V樣:加入反應體系中上清液體積,100μL=0.1 mL;T:反應時間,1min。


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