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    果糖1,6二磷酸酯酶生化檢測試劑盒

    型 號

    產品時間2024-11-21

    所屬分類糖異生系列

    報價300

    產品描述:果糖1,6二磷酸酶(FBP)/果糖1,6二磷酸酯酶生化檢測試劑盒果糖-1,6二磷酸酶又稱果糖1,6二磷酸酯酶,催化1,6二磷酸果糖和水生成6磷酸果糖和無機磷,在糖的異生代謝和光合作用同化物蔗糖的合成中起關鍵性的作用。

    產品概述

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    產品名稱

    規格

    貨號

    果糖1,6二磷酸酶(FBP)/果糖1,6二磷酸酯酶生化檢測試劑盒

    100/96 50/48   

    EY-01S1375

     

    10.png

    測定意義

    果糖-1,6二磷酸酶又稱果糖1,6二磷酸酯酶,催化1,6二磷酸果糖和水生成6磷酸果糖和無機磷,在糖的異生代謝和光合作用同化物蔗糖的合成中起關鍵性的作用。

    測定原理

    FBP催化1,6二磷酸果糖和水生成6磷酸果糖和無機磷,在反應體系中添加的磷酸糖異構酶和6-磷酸糖脫氫酶依次催化生成6-磷酸糖酸和NADPH340nm下測定NADPH增加速率,即可計算FBP活性。

    需自備的儀器和用品

    分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

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    試劑一:液體×1瓶,室溫保存。

    試劑二:液體×1瓶,4℃保存。              

    試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現配現用。

    試劑四:液體×1支,4℃保存。

    12.png

    1、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。

    2、細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測。

    3、血清等液體:直接測定。

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    (1)按照蛋白濃度計算

    活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

    ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T

    =1608×△÷Cpr

    (2)按照樣本質量計算

    活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

    ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T

    =1608×△A÷W

    (3)按細胞數量計算

    活性單位定義:25℃中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

    ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細胞數量×V樣÷V樣總)÷T

    =1608×△A ÷細胞數量13.png

    (4)按液體體積計算

    活性單位定義:25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

    ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T

    =1608×△A

    ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光徑,1 cm;V反總:反應體系總體積,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;V樣:加入反應體系中上清液體積,100μL=0.1 mL;T:反應時間,1min。

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