技術(shù)文章/ARTICLES

    亮發(fā)光桿菌該法是采用采用成熟的擔(dān)孢子萌發(fā)培養(yǎng)成菌絲體而得到純菌種的方法。擔(dān)孢子具備親本的遺傳特性，但變異的機(jī)會(huì)多，生命力強(qiáng)，可能選育出優(yōu)良的菌株。“種茹”的選擇要求與組織分離法一樣，但成熟度要求八九分成熟的金針茹子實(shí)體，因?yàn)檫@時(shí)的孢子萌發(fā)力強(qiáng)，數(shù)量多，分離之后可供挑選的機(jī)會(huì)多。孢子分離法有單孢分離與多孢分離兩種方法，馴化育種采用的是多孢子分離法，該法又分為“種茹”孢子彈射法和菌褶貼管壁法兩種。 
    (1)“種茹”孢子彈射法：取“種茹”切去菌柄，表面用70%的酒精擦洗干凈或浸入0.1%的升水中1~2min，無(wú)菌水沖洗數(shù)遍后，用濾紙吸干表面水分。在接種箱或無(wú)菌室內(nèi)按無(wú)菌操作規(guī)程將“種茹”的菌褶朝下，用鐵絲支撐置于培養(yǎng)皿上，放在消毒擦洗過(guò)和大型鐘罩下，把滅菌過(guò)的濾紙置于培養(yǎng)皿容器內(nèi)。整個(gè)裝置要讓之通氣，否則罩內(nèi)濕度過(guò)大，孢子反而不易落下。經(jīng)過(guò)12~20h，就可以看到在培養(yǎng)皿內(nèi)或?yàn)V紙上散落一層白色的孢子印。用無(wú)菌接種環(huán)沾取少量的孢子，置于盛有無(wú)菌生理鹽水的大試管或三角燒瓶中稀釋?zhuān)瞥涉咦討腋∫海儆脽o(wú)菌的注射針筒或滴管，吸取孢子懸浮液，注入1~2滴孢子液于培養(yǎng)基表面，并用無(wú)菌接種環(huán)涂布培養(yǎng)，待孢子萌發(fā)后挑取孢子萌發(fā)早、長(zhǎng)勢(shì)好的菌落進(jìn)行轉(zhuǎn)管培養(yǎng)。 
    (2)菌褶貼管壁法：鉤取一塊干凈、發(fā)育良好的金針茹菌褶，在無(wú)菌操作條件下，貼在斜面培養(yǎng)基上方的試管內(nèi)壁上，為了讓之貼牢，可加1~2滴無(wú)菌水在試管壁上。放好菌褶后，塞入棉塞，置于適溫條件下培養(yǎng)。待看到培養(yǎng)基上產(chǎn)生與菌褶相應(yīng)大小的霧狀物時(shí)，立即將附在試管壁上的菌褶片在無(wú)菌條件下取出。待長(zhǎng)成肉眼可見(jiàn)的菌絲時(shí)，挑取并放入新的試管培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。 
    亮發(fā)光桿菌孢子分離污染率較高，要剔除肉眼可見(jiàn)的各種雜菌。之后，挑取的各菌株一定要經(jīng)過(guò)出茹試驗(yàn)來(lái)鑒定是否是優(yōu)良的馴化菌株。

 Phospho-Cofilin (Ser3) 環(huán)化核苷酸調(diào)控陽(yáng)離子通道蛋白亞型4

 Phospho-Cofilin/CFL1 (Tyr139) 環(huán)核苷酸陽(yáng)離子通道蛋白α2抗體

 Phospho-Connexin 43 (Ser368) 還原型輔酶Ⅱ抗體

 phospho-Cortactin (Tyr466) 踝蛋白抗體

 phospho-CPI17 alpha (Thr38) 滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1抗體

 phospho-c-Raf (Ser259) 琥珀酸脫氫酶復(fù)合體亞基A抗體

 phospho-c-Raf (Ser289) 呼吸道合胞病毒單克隆抗體

 phospho-c-Raf (Ser296) 后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3抗體

 phospho-c-Raf (Ser338) 紅細(xì)胞生成素受體抗體
亮發(fā)光桿菌