技術文章/ARTICLES

1.青海發光桿菌醋酸菌斜面培養基：葡萄糖 1克，酵母膏1克，碳酸鈣1克，瓊脂2.5克，水100毫升

 
2.斜面培養斜面制作：培養基按配方調配好（碳酸鈣先不加入），分裝試管，滅菌備用。碳酸鈣按比例分裝、滅菌。擺斜面前將培養基和碳酸鈣混合，用手搓均勻，然后擺斜面，備用
 
3.  Acetobacter Medium (醋酸菌培養基)
Glucose (葡萄糖) 100g
Yeasst extract (酵母膏) 10g
CaCO3 20g Agar (瓊脂) 15g
Distilled water (蒸餾水) 1000ml
Adjust (調) pH to 6.8
適用范圍：惡臭醋酸桿菌混濁變種
 
 3．1 斜面培養基
葡萄糖8g，酵母粉10g碳酸鈣5g瓊脂15~20g水1000mLpH5.5，分裝試管。0.IMPa滅菌20min。95％酒精(食用級)40mL。擺斜面，
 
3．2 液體增殖培養基
葡萄糖10g 酵母粉10g pH5.5水1000mL滅菌后加入酒精(食用級)40mL 0.1MPa滅菌20min。
 
3．3 醋酸菌種的制備
青海發光桿菌擴大培養過程：安瓿管，液體試管1．液體試管2，100mL三角瓶，500mL三角瓶，1000mL三角瓶，種子罐。
 
3．3．1 安瓿管開啟：酒精棉球擦抹三次，用重器撞擊，打開，注入0.5mL無菌水，將菌球溶解，全部注入裝有10mL液體培養基的18×180試管1內，30℃培養72h，每2h搖動—次
 
3．3．2 菌體生長：培養基變混濁后，顏色變淺，對光觀察搖動時有云霧狀金屬光澤。每只裝有10mL液體培養基的試管2接入lmL或0.5mL菌液，30℃培養48h，每2h搖動—次。
 
3．3．3 三角瓶三級擴培，三角瓶中培養基的裝量為50％，每級按種量在10％左右，在轉換振蕩器上恒溫培養，培養溫度均為30℃，時間依次縮短為36、36、24h，
 
3．3．4 種子罐培養基同前 配料后種子罐夾套加熱滅菌100℃保持15min，冷卻后，先加入4％食用酒精，無菌操作接入菌種。接種量為10％~12％，溫度保持在30℃±1℃，通無菌空氣，菌體生長時間為24~36h．視菌體生長情況及鏡檢結果而定
 
3．3．5 青海發光桿菌每次接種前，先將菌種進行外觀觀察 。有異樣情況者，作涂片、染色、鏡檢觀察，菌體生長不正常或染菌的三角瓶不得使用。外觀正常者抽檢2—3個樣品，在確保菌株純度、無污染的情況下轉入下一級菌種擴培。培養醋酸菌時，需要用含糖或酵母膏（維生素B）的培養基，在肉湯蛋白胨培養基上生長不良。大多數菌株可用六碳糖和甘油作為碳源，對甘露醇和葡萄糖酸鹽很少能利用或不能利用，不分解乳糖、糊精和淀粉。醋酸菌不形成芽孢，一般為形態近于球菌的短桿菌。醋酸菌可在PH4.3以下繁殖，增殖時多在液面成膜。幼齡細胞呈G-，老齡細胞呈可變性，因而染色只用來作為鑒定時的參考因素。